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CRISPR/Cas9质粒服务,助力sgRNA表达和基因编辑

开云提供的CRISPR材料来源于张锋实验室,所提供的CRISPR产品和服务得到美国Broad研究所授权许可。包括:

  • 已经被MIT设计并验证的sgRNA序列
  • 包含all-in-one和Dual多种类型的载体选择,并可根据需要筛选抗性
  • 经MIT验证的空载类型
  • 多种Cas9类型:包含eSpCas9,SpCas9,SpCas9 Nickase,SaCas9和SAM

服务优势

特异性sgRNA序列


sgRNA序列由MIT验证


野生型SpCas9和SAM的人或小鼠的sgRNA序列库

及时交付


20,000+条sgRNA隔天交付*


可设计多达12个物种的gRNA序列

服务详情

  • 服务类型

  • 服务规格Hot

  • Cas9概览

  • 电子资源

CRISPR gRNA数据库

开云提供超20,000种含有gRNA序列的plentiCRISPRV2质粒,所有sgRNA序列已经被MIT验证。在数据库中,您可通过搜索基因名称,基因标志或ID来查找相关gRNA。

服务 递送方式 筛选标记
GenCRISPR质粒库 Lentiviral Amp,Puro

为满足您多种需求,开云不仅提供多种Cas9类型的定制质粒,也提供经由MIT验证的空载供您选择。

一、定制质粒类型

根据Cas9类型,定制质粒包含如下几种:

1. 增强CRISPR/SpCas9质粒-eSpCas9New

特异性增强SpCas9(Enhanced specificity SpCas9,eSpCas9),指的是SpCas9(K848A/K1003A/R1060A),是经过MIT张锋实验室特异性改造的质粒(Slaymaker et al. 2016).eSpCas9可以降低脱靶效率,比自然SpCas9脱靶效率降低10倍之多,同时可实现基因高效编辑。

Cas9基因组编辑依赖于DNA双链的分离。sgRNA与非靶向DNA序列的不匹配可能导致非特异性结合和分裂。为了提高基因组编辑的特异性,科学家开发了突变为K848A、K1003A和R1060A的eSpCas9。在SpCas9的非靶链沟槽内中和这些带正电荷的残基,既可以减少非靶结合,也可以刺激靶向结合,这一操作需要更严格的Watson-Crick碱基配对。

服务 递送方式 筛选标记
eSpCas9质粒 Plasmid
Lentiviral
Puro
GFP
获取报价

2. SpCas9质粒Hot

Cas9内切酶是基因编辑的研究标准。当与单导RNA(single guide RNA,sgRNA)序列结合时,这些酶在基因组中产生位点特异性双链断裂(double strand breaks,DSBs)。

  • SpCas9/sgRNAs可以在all-in-one载体中表达,也可以在dual载体中单独表达。
  • 优选的靶上SpCas9 PAM序列为NGG。
  • SpCas9还包含NGA序列的目标亲和力。
服务 递送方式 筛选标记
SpCas9 Plasmids Plasmid
Lentiviral AAV
Amp
Amp,Puro
Amp,Neo
Amp,GFP
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3. SpCas9 Nickase质粒

SpCas9 nickase(Cas9n D10A)包含一个突变,不同于SpCas9切割时形成DSB,SpCas9 nickase在切割序列时形成单链缺口。经过SpCas9 nickase切割后,两个相对的gRNA序列可以有效配对,因为这种方法可以避免不必要的插入。

服务 递送方式 筛选标记
SpCas9 Nickase Plasmids Plasmid
Lentiviral
Amp
Amp,Puro
Amp,GFP
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4. SaCas9质粒

黄色葡萄球菌Cas9同源体(Staphylococcus aureus Cas9 orthologue,SaCas9)是腺相关病毒(adeno-associated virus AAV AAV)应用的理想内切酶。SaCas9比SpCas9大约短1kb,这允许了在AAV组装时更加灵活。AAV载体较低的免疫原性,使SaCas9非常适合于体内编辑的。

  • 优选的靶SaCas9 PAM序列为NNGRRT。
  • SaCas9对NNGRRN也有很高的亲和性。
服务 递送方式 筛选标记
SaCas9 plasmids AAV Amp 获取报价

5. 转录激活(Transcription Activation,SAM)质粒

CRISPR/Cas9协同激活介质(SAM)系统已被设计用于激活下游目标的转录。SAM系统使用三种不同的激活因子,VP64、P65和HSF1,它们被组装到催化失活的Cas9(dead Cas9,dCas9)复合物上驱动转录。

  • SAM复合物由三个组分组成:一个由两个MS2 RNA适配体组成的gRNA、一个催化失活的dCas9-VP64融合蛋白,和一个MS2-p65-hsf1激活因子融合蛋白。 
  • SAM系统能够激活编码和非编码的元素。
  •   查找经由MIT验证的SAM gRNA序列,请前往gRNA数据库。
服务 递送方式 筛选标记
SAM gRNA Plasmids Plasmid
Lentiviral
Amp
Amp,Zeo
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SAM dCas9-VP64 Plasmids Lentiviral Amp,Blast
Amp,GFP
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SAM MS2-P65-HSF1 Plasmids Lentiviral Amp,GFP
Amp,Hygro
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二、空载服务

为满足您的科研需要,开云提供空载服务,载体序列已经由MIT验证。这些载体包含一个17bp-1.8kb的可表达连接体,以代替定制的sgRNA序列,您可根据需要对其进行修改。

服务 递送方式 筛选标记
eSpCas9 and SpCas9 Broad Plasmid Collection Plasmid
Lentiviral
Amp,Puro
Amp,GFP
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SpCas9 Nickase Broad Plasmid Collection Plasmid Amp
Amp,Puro
Amp,GFP
获取报价
SaCas9Broad Plasmid Collection AAV Amp 获取报价

如果对于CRISPR 质粒有任何问题或建议,请联系开云专业技术支持人员。

如您有任何问题请联系我们
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